高效液相色谱仪的四种维护心得

样品峰保留时间漂移的主要因素：

（1）泵中有气泡；

（2）色谱柱没有平衡好；

（3）室内温度变化过大；

（4）流动相互相成进行分发生变化；

（5）该流动相有没有进行适宜此样品的检测；

基线漂移主要因素：

（1）柱温波动；

（2）流动相不均匀；

（3）使用循环溶剂；

（4） 探测器出口堵塞；

（5） 流动相污染与变质作用；

（6）或流动池被污染的气体；

（7）流动相配比处理不当或流速不断变化；

检测器灵敏度不够的主要因素：

（1）电压不稳；

（2）波长设置不正确；

（3） 探测池的窗户被污染了；

（4）检测数据池中有气泡；

（5）样品进样量不足；

（6）流动相流速不合适；

色谱柱的使用和维护注意事项：

（1） 为避免压力和温度的突然变化以及机械振动柱压力的突然升高或降低也会对柱内填料产生冲击，因此在调节流量时应缓慢进行，阀门在注入时的旋转不宜过慢;

（2）应逐渐发展改变传统溶剂的组成特别是通过反相色谱中,不应进行直接从有机结合溶剂改变为全部是水反之亦然;

（3） 一般来说，柱子是不能后退的,只有当生产商表明可以对塔进行反冲时，才能除去塔头中残留的杂质,否则进行反冲会迅速发展降低柱效;

（4）选择可以使用一个适宜的流动相尤其是pH,以避免固定相被破坏;

（5）避免将复杂样品,特别是生物样品直接注入柱内需要对样品进行预处理或在取样器与柱之间连接保护柱;

（6）经常用强溶剂进行冲洗以及色谱柱清除数据保留在柱内的杂质;

（7）在保留柱的同时，柱应充满乙腈或甲醇，柱接头应拧紧，以防止溶剂挥发和干燥,缓冲溶液禁止留在塔内放置到第二天或更长的时间;

（8）液相色谱,色谱柱使用管理过程中,如果没有压力不断升高一种方式可能是滤片被堵塞,这时应更换滤片或将其取出数据进行及时清洗,另一种情况可能是由于大分子物质进入柱内使柱头被污染,如果柱效降低或色谱峰变形则可能柱头出现塌陷死体积逐渐增大。

（9）基于二氧化硅填料只能在pH2的〜9的范围内使用,每次进行分析方法检测工作完成后，至好用洗脱技术能力强的洗脱液冲洗，例如ODS柱宜用甲醇冲洗至基线系统平衡;