一、原理
样品经甲醇回流提取,再用稀盐酸水解,用二氯甲烷萃取.. 样品用高效液相色谱仪用二极管阵列检测器或紫外检测器检测.
二、试剂配制
1,磷酸(0.1%)的水溶液:取磷酸(3.1.3)为1.0mL,加水至1000mL。
2、稀盐酸:取盐酸(3.1.5)234mL,用水进行溶解并定容至1000mL。
3,无水乙醇 - 乙酸乙酯(2 + 1)的混合溶液:无水乙醇500毫升和250毫升乙酸乙酯,并充分混合。
4、甲酸通过水溶液(0.1%):取甲酸(3.1.8)1.0mL加水进行稀释并定容至1000mL。
三、仪器和设备
1.高效液相色谱仪:配备二极管阵列检测器或紫外检测器..
2、超声波清洗器。
3、高速万能粉碎机。
4,分析天平:音量,分别0.01克和为0.01mg感。
5、电热恒温水浴锅。
6、旋转蒸发仪。
7、氮吹仪。
四、固态试样或半固态试样
取适量进行固态材料试样代用茶及片剂,胶囊主要内容物,颗粒剂等保健功能食品混匀,研细或取适量半固态金属试样软胶囊以及内容物混匀称取0.5g~1g精确至0.001g,置平底烧瓶中,加入其中甲醇50mL混匀称定重量加热系统回流1h放冷再称定重量,用甲醇可以补足减失的重量摇匀滤过精密科学吸取续滤液25mL,于平底烧瓶中蒸干或氮吹至干加入经过稀盐酸30mL超声2min加热方式回流发生水解1h立即通过冷却,置于分液漏斗中,先用一些少量水洗涤反应烧瓶再用自己少量二氯甲烷作为洗涤烧瓶并入分液漏斗中,酸液再用二氯甲烷振摇提取4次用量问题依次为40mL、30mL、30mL、20mL合并二氯甲烷液减压方法回收利用溶剂至干残渣用无水就是乙醇-乙酸乙酯(2:1)混合溶液溶解转移至25mL量瓶中,稀释至刻度,将有机溶液用0.45μm微孔膜过滤,将滤液稀释至基于内的实际浓度的合适的线性标准曲线备用。
五、标准曲线的制作
将标准这一系列作为工作液按液相色谱技术参考其他条件进行分析测定,测定以及相应的色谱峰面积,以标准检测工作液的浓度(μg/mL)为横坐标,以色谱峰的峰面积为纵坐标,绘制一个标准工作曲线。
六、试样溶液的测定
用液相色谱参考条件(5.2)测定样品溶液(5.1),得到相应样品溶液的色谱峰面积。标准浓度曲线根据组件进行测量,至少两次的平行测量次数。
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