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液相色谱的组成及通路

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发布时间:2024-05-31

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高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography/ HPLC),其中chromatography来自于希腊字,其中 chroma 的意思是颜色,高效液相怎么能跟颜色扯上关系呢?

“色谱法”(Chromatography)和“色谱图”(Chromatogram)是俄国植物化学家茨维特(Tswett)于1903年首次提出的,他在成功分离叶绿素和类胡萝卜素后发现他们呈现出不同颜色的条带。因此,茨维特把这种分离技术取名为色谱。因为Tswett的开创性工作,人们尊称他为"色谱学之父",但是他的论文大都发表在不太知名的期刊上,所以在当时没有引起注意。直到他去世十余年后的1931年,一名R.库恩的科研人员发现茨维特所发明色谱法的重要性,色谱法才得到推广应用。

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液相色谱是用来干什么的?

在实验室中我们见到最常用的色谱是气相色谱和液相色谱。液相之所以叫液相色谱,是以为其流动相为液体。

高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,经过泵的推动作用将流动相泵入系统,样品经过进样系统进样,然后被流动相载入色谱柱中,根据样品溶液中的各组分在两相中分配系数的不同完成分离,随后分离的组分依次通过检测器进行检测并转换为电信号在计算机上显示出来。

那什么时候可以用气相什么时候可以用液相色谱分析呢?气相色谱通过温度和载气的作用,将样品变为气态,然后让其在色谱柱中运动起来达到分离的效果,但有的样品沸点太高,或者加热就分解,气相就难以胜任,这时候就可以选择使用液相色谱。

液相色谱的组成

HPLC是一种区别于经典液相色谱,基于仪器方法的高效能分离手段。目前常见的HPLC仪国外厂家有Waters 公司、Agilent公司、赛默飞公司、岛津公司等。

液相色谱一般都有这四个部分组成,分别是泵(purge)、进样系统、色谱柱和检测器。此外还有数据记录设备(计算机)等等。

泵:把流动性连续稳定的注入系统,提供稳定的推动力。泵经过发展经历了很多进化,现在应用最多的是“柱塞往复泵”。

进样系统:负责把液体样品引入系统。有手动进样和自动进样。

色谱柱:用于样品分离,可以说是色谱系统的心脏。要求柱效高、选择性好,分析速度快等。在柱子使用时候应注意柱子使用前的活化和使用后的保存,同时关注柱子使用时的温度和压强。


检测器:负责检测从色谱柱出来的样品。常用的检测器有紫外检测器、示差折光检测器和荧光检测器三种。 作者:21世纪是生物学的世纪 https://www.bilibili.com/read/cv14062516/ 出处:bilibili

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