高效液相色谱仪检测固体废物中草甘膦的含量

高效液相色谱仪检测固体废物中草甘膦的含量

一、原理

水样过滤后，用阳离子交换柱进行高效液相色谱仪等度分析在 65°C 下，被测物用次氯酸钙氧化，其产物氨基乙酸用含有 2-巯基乙醇的邻苯二甲醛在 38°C 进行反应，得到有荧光相应的物质荧光检测的激发波长为 340 nm，发射波长为＞455 nm。

二、试剂和材料

高效液相色谱仪流动相

试剂水，高纯水

取 0.005 M KHPO 4 （0.68 gm）溶于 960ml 试剂水中，加入 40ml 高效液相色谱仪级甲醇，用浓磷酸将 pH 调至1.9混匀后用 0.22µm 过滤膜过滤并脱气。

柱后衍生溶液

次氯酸钙溶液，取 1.36gKHPO 411.6gNaCl 和 0.4gNaOH 溶于 500ml 去离子水中加入将 15mgCa（ClO） 2 溶于 50ml 去离子水的溶液将溶液用去离子水稀释至 1000ml用 0.22µm 膜过滤备用建议该溶液每天新鲜配制。

邻苯二甲醛（OPA）反应液

将 10ml2-巯基乙醇和 10ml 乙腈以 1：1 比例混合。密封储存在通风橱中。

硼酸钠（0.025mol/L），将 19.1g 硼酸钠（Na 2 B 4 O 7 ·10 H 2 O） 溶于 1.0L 试剂水中如果在使用前一天配制，硼酸钠在室温下会完全溶解。

OPA 反应液，将 100±10mg 邻苯二甲醛（熔点：55-58℃）溶于 10ml 甲醇中加入1.0L0.025mol/L 硼酸钠溶液混匀，用 0.45µ 膜过滤后脱气加入10µl2-巯基乙醇溶液并混匀除非能够隔绝氧气保存，否则此溶液应该每天新鲜配制溶液在空气中低温4℃保存两周没有明显增加的荧光本底噪音；如果在氮气保护条件下可长期保存亦可以买到商品化的荧光醛。

样品保护试剂：硫代硫酸钠，颗粒，分析纯。

标准储备液1.00µg/ml准确称取 0.1000g 纯草甘膦溶于 1000ml 去离子水中。

三、仪器和设备

高效液相色谱仪，具有荧光检测器，200µl 定量环。

色谱柱，250×4 mm, 钾型阳离子交换柱，在 pH = 1.9，65℃下填装。

保护柱，C18 填料，或者与色谱柱填料相近的保护柱。

柱温箱。

柱后反应装置，包括两个柱后衍生泵，一个三通，两个 1.0ml 特富龙材质延迟管线（控温在 38℃）。

四、分析步骤

样品净化，高效液相色谱仪方法直接用水溶液进样，样品净化步骤仅涉及过滤。自来水、地下水和市政污水用过滤方法处理亦未发现明显的干扰。如果特殊情况下需要其它的净化步骤，需要符合本方法指定的回收率要求。

分析条件

高效液相色谱仪分析

色谱柱： 250×4 mm, 阳离子交换柱，柱温：65℃；

流动相：0.005 M KHPO4-水-甲醇（24：1），pH = 1.9；

流速：0.5ml/min；

进样体积：200µl；

检测：激发波长：340nm，发射波长：455nm。

柱后衍生条件

次氯酸钙溶液流速：0.5ml/min；

OPA 溶液流速：0.5ml/min；

反应温度：38℃。